在日常分離分析工作中,c18色譜柱維護是否得當,直接影響色譜柱的壽命。下面介紹c18色譜柱在日常使用過程中應注意的事項。(1)柱子在裝卸、更換時,動作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動,以免柱床產生空隙。
(2)如使用柱溫控制裝置時,應注意在通入流動相后才能升溫。
(3)如果儀器用來做常規分析,樣品種類有限,但分析次數多,則不妨為每一類常規分析配置1根柱,這樣有助于延長柱子的壽命。
(4)流動相使用前需進行脫氣處理,以免降低柱效和影響檢測等。樣品溶液需經適當的前處理及過濾,以減少柱污染和堵塞。
(5)在更換流動相種類時,應注意溶劑的互溶性,防止發生鹽析現象。
(6)c18色譜柱屬非極性鍵合相色譜柱,流動相的ph值應嚴格控制在2~7之間,以免損壞柱子。
(7)柱子的實際操作壓力應低于填裝時的高壓力,一般在高壓力一半以下。一般不超過20 593.965~29 419.95 kpa。在低壓力(≤14 709.975 kpa)的范圍使用,可使柱保持長時期的高柱效。
(8)在完成分離分析工作之后,不應立即停機,需及時對色譜分析系統進行沖洗,一般0.5 h以上,以除去色譜柱內的雜質。
(9)c18一般用100%methanol作為保存溶劑,以防柱子干裂而損壞。嚴禁水或緩沖溶液長時間在色譜流路中保留。
(10)如果流動相中有鹽類,首先用水充分清洗。如果是胺類添加到流動相中,要用50%methanol和0.05%磷酸溶液混合溶劑沖洗,不要只用水沖洗。
(11)選用合適的c18保護柱,以保護分析柱免受雜質顆粒及不可逆吸附的干擾物的影響。保護柱內裝填料顆粒度應與分析柱填料的顆粒度盡量一致。
(12)柱的保存期不宜太長。短期不用的c18柱,用methanol沖洗30~60 min,然后將柱兩端密封。較*不用的柱子,一是采取定期沖洗,再密封的方法;二是在沖洗后,柱兩端各裝1只有一定容量的灌滿methanol的容器(只裝一端也可),以補充在較長存放期間柱內溶劑的蒸發。